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知识点19 生物技术实践
1(2015·广东高考·T3)关DNA实验叙述正确( )
A兔成熟红细胞提取DNA
BPCR循环般次变性—延伸—复性三步
CDNA溶液二苯胺试剂混合沸水浴生成蓝色产物
D甲基绿口腔皮细胞染色细胞核呈绿色细胞质呈红色
解题指南(1)题干关键词提取DNAPCR二苯胺试剂甲基绿
(2)关键知识DNA提取检测方法PCR反应程甲基绿作
解析选C题考查实验原理选材试剂兔哺乳动物成熟红细胞中细胞核中提取DNAA项错误PCR次循环分变性—复性—延伸三步B项错误沸水浴条件DNA遇二苯胺变成蓝色C项正确甲基绿DNA呈现绿色细胞核细胞质含DNA会呈绿色D项错误
2(2015·江苏高考·T11)列关固定化酶固定化细胞叙述错误
( )
A固定化酶目实现酶重复利
B溶解氧交换受阻固定化酶应重限制素
C固定化细胞生产分泌细胞外产物
D凝胶包埋细胞间通价键结合
解析选B题考查固定化酶固定化细胞固定化酶制作目够利发酵产物中酶分离出够酶反复A项正确溶解氧交换受阻会影响细胞呼吸固定化细胞应重限制素B项错误固定化细胞生产获细胞代谢产物C项正确细胞包埋孔载体部制成固定化细胞细胞凝胶通价键结合D项正确
3(2015·江苏高考·T17)关腐乳制作实验列叙述错误( )
A腐乳坯堆积起会导致堆温度升高影响毛霉生长
B腐乳坯细菌污染腐乳坯表面会出现黏性物
C勤腐乳坯表面喷水利毛霉菌丝生长
D装坛阶段加入料酒效防止杂菌污染
解析选C题考查腐乳制作程材料处理方法目腐乳坯堆积起会导致微生物量繁殖堆温度升高影响毛霉生长A项正确正常情况毛霉等菌种会豆腐表面长出层菌丝细菌污染腐乳坯表面会出现黏性物B项正确适做腐乳豆腐含水量70左右适毛霉菌丝生长加水利腐乳成形C项错误装坛时加入料酒抑制杂菌生长D项正确
4(2015·江苏高考·T19)做微生物分离培养实验时列叙述正确( )
A高压灭菌加热结束时开放(排)气阀压力表指针回零开启锅盖
B倒板时应开皿盖放边免培养基溅皿盖
C防止污染接种环火焰灭菌应趁热快速挑取菌落
D记号笔标记培养皿中菌落时应标记皿底
解题指南关键知识培养基灭菌方法倒板方法接种程
解析选D题考查微生物分离培养实验高压蒸汽灭菌加热结束然冷慢慢开排气阀排余气然开盖取物A项错误倒板时左手培养皿右手锥形瓶左手培养皿开条稍瓶口缝隙倒入培养基立盖培养皿皿盖B项错误灼烧接种环冷伸入菌液免温度太高杀死菌种C项错误皿底标记会盖子混淆混淆D项正确
5(2015·四川高考·T3)列酵母菌材料进行实验关叙述错误
( )
A探究酵母菌呼吸方式溴麝香草酚蓝检测产生CO2
B酵母菌发酵酿制果酒选择酸性重铬酸钾检测产生酒精
C探究酵母菌种群数量变化应设空白排关变量干扰
D稀释涂布板法培养计数应选择30~300菌落数板
解题指南(1)题干关键词酵母菌错误
(2)关键知识酵母菌氧呼吸产物鉴定原理探究酵母菌种群数量变化实验设计原计数方法
解析选C题考查酵母菌细胞呼吸方式探究种群数量变化研究A项酵母菌呼吸作产生CO2溴麝香草酚蓝水溶液蓝变绿变黄正确B项橙色酸性重铬酸钾酒精发生化学反应变成灰绿色正确C项探究酵母菌种群数量变化时间取样必设空白错误D项菌落数太少话准确太话计数般选择30~300菌落数板计数正确
6(2015·江苏高考·T24)图苹果酒发酵装置示意图列叙述错误(选)( )
A发酵程中酒精产生速率越越快
B集气中气体酵母菌氧呼吸产生CO2
C发酵程中酵母菌种群呈J型增长
D发酵液表面出现菌膜原发酵瓶漏气
解析选ABC题考查果酒制作原理步骤注意事项发酵期底物减少酒精浓度增加等素会造成酒精生产速率减慢A项错误发酵初期发酵瓶中氧气酵母菌进行氧呼吸产生CO2B项错误酵母菌种群数量先增加减少C项错误发酵瓶漏气会醋酸菌等量繁殖形成表面观察菌膜D项正确
7(2015·山东高考·T35)乳糖酶够催化乳糖水解葡萄糖半乳糖具重应价值乳糖酶制备固定化步骤
(1)筛选产乳糖酶微生物L时宜 作培养基中唯碳源培养基中琼脂作 功讲种培养基属
(2)培养微生物L前宜采 方法接种环进行灭菌
(3)纯化乳糖酶电泳法检测分子量(相分子质量)相条件带电荷相蛋白质电泳速度越快说明分子量(相分子质量)越
(4)乳糖酶宜采化学结合法(价键结合法)进行固定化通检测固定化乳糖酶 确定应价值化学结合法外酶固定化方法包括 离子吸附法交联法等
解析(1)已知乳糖酶够催化乳糖水解葡萄糖半乳糖筛选产乳糖酶微生物L时宜乳糖作培养基中唯碳源培养基中琼脂作凝固剂功讲种培养基属选择培养基
(2)避免杂菌污染培养微生物前接种环应采灼烧灭菌
(3)电泳法纯化乳糖酶时相条件分离带电荷相蛋白质分子量(相分子质量)越电泳速度越快
(4)固定化酶应价值酶活性(活力)关化学结合法固定化乳糖酶时通检测固定化乳糖酶活性(活力)确定应价值固定化酶方法包括化学结合法包埋法物理吸附法离子吸附法交联法等
答案(1)乳糖 凝固剂 选择培养基 (2)灼烧 (3)
(4)(酶)活性[(酶)活力] 包埋法 物理吸附法(注两空颠倒)
8(2015·全国卷Ⅰ·T39)已知微生物A产生油脂微生物B产生脂肪酶脂肪酶油脂生物柴油生产回答关问题
(1)显微观察时微生物A菌体中油脂通常 染色微生物A产生油脂易挥发选 (填萃取法水蒸气蒸馏法)菌体中提取
(2)然界中获产生脂肪酶微生物B单菌落含油料作物种子腐烂物土壤中取样应选 碳源固体培养基进行培养
(3)测定培养液中微生物B菌体数显微镜 直接计数测定活菌数量选 法进行计数
(4)确定微生物B产生脂肪酶适温度某学测相时间
35℃40℃45℃温度降解10 g油脂需酶量次4mg1mg6mg述三温度中 ℃条件该酶活力进步确定该酶适温度应围绕 ℃设计续实验
解题指南(1)题干关键词易挥发直接计数活菌数量
(2)关键知识提取油脂方法分解油脂微生物分离测定微生物数量方法探究酶适温度方法
解析(1)脂肪苏丹Ⅲ(Ⅳ)染液染成橘黄色(红色)题干中说明微生物A产生油脂易挥发采萃取法提取微生物A中油脂
(2)油脂机化合物富含碳元素然界获够分解油脂单菌落应油脂唯碳源配制培养基该培养基分解油脂微生物正常生长微生物正常生长
(3)利血细胞计数板计数法测定菌液中微生物数量活菌死亡细菌会计数测定培养液中活菌数应采稀释涂布板法
(4)45℃降解10 g油脂需酶量该温度酶活性低题干信息知40℃降解10 g油脂需酶量少应围绕40℃设置温度梯度探究酶适温度
答案(1)苏丹Ⅲ(苏丹Ⅳ) 萃取法 (2)油脂(合理答案)
(3)血细胞计数板 稀释涂布板(合理答案) (4)45 40
9(2015·全国卷Ⅱ·T39)回答胡萝卜素关问题
(1)胡萝卜含胡萝卜素中 (填α胡萝卜素β胡萝卜素γ胡萝卜素)该胡萝卜素体转变成两分子 者缺乏会引起弱光视物清病症该疾病称 胡萝卜素 (填挥发性非挥发性)物质
(2)工业生产养殖岩藻作原料提取胡萝卜素时
(填需需)新鲜岩藻干燥
(3)现乙醇乙酸乙酯两种溶剂应选中 作胡萝卜素萃取剂选外种理
解题指南(1)题干关键信息弱光视物清萃取剂
(2)关键知识胡萝卜素溶水分子β胡萝卜素氧化成两分子维生素A含水量影响胡萝卜素萃取效果
解析题考查胡萝卜素提取
(1)根双键数目胡萝卜素划分αβγ三类β胡萝卜素中组成成分分子β胡萝卜素动物肠肝脏等器官氧化成两分子维生素A胡萝卜素治疗缺乏维生素A引起种疾病夜盲症等胡萝卜素化学性质较稳定溶水非挥发性物质
(2)萃取效果受含水量温度等条件影响保证萃取效果需岩藻进行粉碎干燥
(3)萃取胡萝卜素机溶剂应水混溶乙醇水溶性机溶剂乙酸乙酯水溶性机溶剂选乙酸乙酯
答案:(1)β胡萝卜素 维生素A 夜盲症 非挥发性
(2)需 (3)乙酸乙酯 萃取胡萝卜素机溶剂应水混溶乙醇水溶性机溶剂
10(2015·广东高考·T29)泡菜国传统食品制作程中产生亚硝酸盐体健康潜危害某兴趣组准备参加科技创新赛查阅资料图
(1)制作泡菜时泡菜坛般水密封目 乳酸菌发酵第阶段产物
(2)题图第3天相第8天泡菜更适食者 pH值呈降趋势原
(3)该组株优选乳酸菌(亚硝酸盐原酶活力普通乳酸菌高5倍)拟参资料实验方案食盐浓度(4~10)探究普通乳酸菌相优选乳酸菌制作泡菜程中亚硝酸盐含量高低确定适条件请设计实验结果记录表推测实验结
解题指南(1)图示信息pH乳酸菌数量增加降低乳酸菌数量减少降速率减慢亚硝酸盐含量超定时间会降低
(2)关键知识乳酸发酵原理实验设计分析
解析题考查泡菜制作原理实验设计方法
(1)乳酸菌严格厌氧微生物制作泡菜时水密封泡菜坛目保持氧环境乳酸菌进行乳酸发酵第阶段物质变化氧呼吸第阶段相均葡萄糖分解产生丙酮酸[H]少量ATP
(2)亚硝酸盐体危害较泡菜制作段时间食图中曲线出第8天亚硝酸盐含量前相含量较低程中乳酸菌进行乳酸发酵产生乳酸导致泡菜坛pH降
(3)设计记录表中包含乳酸菌类型食盐浓度发酵时间等变量变量亚硝酸盐含量通相互确定优选乳酸菌制作泡菜程中亚硝酸盐含量高低确定适发酵条件
答案(1)隔绝空气创造氧环境利乳酸菌发酵 丙酮酸[H]ATP
(2)亚硝酸盐含量较低 乳酸菌发酵产生乳酸增
(3)两种乳酸菌泡菜腌制程中亚硝酸盐含量变化表
推测实验结普通乳酸菌相优选乳酸菌制作泡菜时相条件产生亚硝酸盐含量低
11(2015·江苏高考·T31)工瘤胃模仿牛羊等反刍动物胃发酵处理秸秆提高秸秆营养价值增强发酵效果研究员牛胃中筛选纤维素酶高产菌株降解纤维素力进行研究请回答列问题
(1)样品稀释涂布板步骤中列选项需 (填序号)
①酒精灯 ②培养皿 ③显微镜 ④菌水
(2)涂布板时滴加培养基表面菌悬液量宜原
(3)试分装含琼脂培养基时试口粘附培养基需酒精棉球擦净原
(4)刚果红纤维素形成红色复合物纤维素降解产物纤维二糖葡萄糖发生种反应研究员刚果红培养基板筛选株透明降解圈菌落(见图)图中降解圈纤维素酶 关图中降解纤维素力强菌株 (填图中序号)
(5)研究员筛选纤维素酶高产菌株J1J4温度pH条件进行发酵测发酵液中酶活性结果见图推测菌株 更适合工瘤胃发酵理
解析题考查微生物分离培养(1)样品稀释涂布板操作程需显微镜(2)涂布板时培养基表面菌悬液会出现积液造成菌体堆积影响分离效果(3)试口粘附培养基需酒精棉球擦净避免培养基污染棉塞(4)菌株产生降解纤维素酶量越活性越高会降解圈越降解纤维素力强菌株①菌株菌落降解圈(5)分析图中曲线知J4菌株较高温度酸性环境酶活性更高发酵程会产热产酸J4菌株更适合工瘤胃发酵
答案(1)③ (2)培养基表面菌悬液会出现积液导致菌体堆积影响分离效果
(3)避免培养基污染棉塞 (4)量活性 ①
(5)J4 发酵程会产热产酸J4菌株较高温度酸性环境酶活性更高
12(2015·浙江高考·T17)生物技术实践模块
某工厂生产耐高温植酸酶饲料添加剂开展产该酶菌株筛选酶固定化特性分析研究流程图示
土样中菌种筛选 → 菌株鉴定 → 优良菌株扩培养 → 植酸酶提纯 →
植酸酶固定化 → 植酸酶特性分析
请回答
(1)土壤悬液首先80℃处理15分钟目筛选出
(2)菌条件处理土壤悬液进行 然涂布含植酸钠固体培养基培养观察 周围出现透明水解圈圈直径 强弱相关
(3)筛选获菌株鉴定优良菌株进行液体扩培养培养时需振荡目 液体培养基固体培养基相含成分
(4)合适条件提纯植酸酶海藻酸钠混合滴加定浓度钙离子溶液中液滴形成凝胶固体球该程酶进行
A吸附 B包埋 C装柱 D洗涤
(5)温度植酸酶相酶活性关系图示列叙述错误
A测试温度中固定化非固定化植酸酶适温度分60℃45℃
B测试温度范围固定化植酸酶相酶活性波动低非固定化植酸酶
C固定化非固定化植酸酶相相酶活性80时温度范围较宽
D65℃时固定化非固定化植酸酶相酶活性蛋白质变性位低点
解题指南(1)关键词菌株筛选扩培养相酶活性
(2)关键知识选择培养应筛选耐高温菌株方法扩培养方法包埋法应温度影响酶活性特点
解析题考查细菌分离培养酶固定化
(1)土壤悬液首先80℃处理15分钟杀死耐高温菌株筛选出耐高温菌株
(2)处理土壤悬液菌条件稀释降低细菌浓度便相互分离单菌落含植酸钠培养基培养细菌植酸酶活性高菌株分解植酸钠周围出现较透明水解圈(3)菌株扩培养般液体培养基固体培养基成分基相含琼脂液体培养基培养优良菌株时需振荡便液体培养基底部较高含氧量利细菌生长繁殖(4)海藻酸钠遇钙会形成凝胶固体球方法植酸酶包埋进(5)图中知测试温度中非固定化植酸酶适温度45℃固定化植酸酶适温度60℃A项正确固定化植酸酶相酶活性波动范围约75~110非固定化植酸酶相酶活性波动范围约10~100B项正确固定化植酸酶相酶活性80温度范围30~65℃非固定化植酸酶相酶活性80温度范围40~50℃C项正确65℃时固定化植酸酶相酶活性高低点D项错误
答案(1)耐高温菌株 (2)稀释 单菌落 植酸酶活性 (3)供氧 琼脂
(4)B (5)D
13(2015·海南高考·T30)生物选修1生物技术实践
生产果汁时果胶酶处理果泥提高果汁出汁率回答列相关问题
(1)某学三种果胶酶进行三组实验组实验酶源外条件相测定组出汁量计算组果胶酶活性均值进行较实验目
(2)现种新分离出果胶酶探究适温度某学设计实验取试16支分加入等量果泥果胶酶缓液混匀均分4组分置0℃5℃10℃40℃保温相时间然测定试中出汁量计算组出汁量均值该实验温度设置足处
(3)某学取5组试(A~E)分加入等量种果泥ABCD 4实验组试中分加入等量缓液量种果胶酶然补充蒸馏水4组试液体体积相E组加入蒸馏水试中液体体积实验组相5组试置适宜温度保温定时间测定组出汁量通A~D组实验较实验组出汁量差异实验中检测加入酶量等0条件均实验组相时出汁量E组设计 (填)达目原
解题指南(1)题干关键信息果胶酶出汁量探究适温度
(2)关键知识实验流程设计分析纠错
解析题果胶酶载体考查拟定实验目设计实验步骤设计实验应遵循原
(1)根题意设计组实验中酶源外条件相然测定组出汁量计算组果胶酶活性均值进行较见实验变量果胶酶源变量果胶酶活性(出汁量少反映)该实验目较源果胶酶活性
(2)根实验设计知该实验探究果胶酶适温度变量温度变量果胶酶活性(出汁量表示出汁量越果胶酶活性越高)该实验方案中应该低温适温高温范围设置系列温度梯度实验组进行实验梯度差相等
(3)根题意实验变量果胶酶量变量出汁量实验设计应遵循单变量原等量原原根实验设置通A~D组实验较实验组出汁量差异检测加入酶量等0条件均实验组相时出汁量E组应加入实验组等量缓液符合实验设计单变量等量原E组设计达目
答案(1)较源果胶酶活性 (2)温度范围设置合理 温度梯度设置合理
(3) 未加入缓液
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