实验二十六 糖脂类氨基酸蛋白质性质
实验目
1 熟悉单糖二糖糖性质
2 掌握糖类鉴
3 掌握油脂化学性质
4 掌握氨基酸蛋白质化学性质鉴方法
实验原理
单糖均原性质二糖分子中半缩醛羟基者原性原班德试剂等原糖盐酸苯肼生成糖脎结晶难溶水糖脎生成速度结晶形状熔点均糖异利糖脎生成鉴种糖糖类浓硫酸浓盐酸作酚类化合物缩合成色物质α萘酚作产生紫红色做莫利许试验反应十分复杂利法检出糖类
果糖（酮糖）间苯二酚盐酸溶液作溶液加热快变成鲜红色称西里瓦诺夫试验糖原性酸存加热水解产生分子单糖班德试剂起反应淀粉分子逐步水解溶液碘液作呈颜色蓝变紫红溶液碘液显色时水解终点
油脂般溶水胆盐乳化作油脂微粒较稳定分散水中形成乳浊液油脂般甘油高级脂肪酸呈酯油脂碱性溶液中水解成甘油高级脂肪酸盐——肥皂水解称皂化油脂皂化甘油溶水肥皂水中形成胶体溶液加入饱食盐肥皂盐析出甘油肥皂分开油脂皂化液机酸酸化析出固体高级脂肪酸钙镁等金属盐类作生成溶水钙肥皂镁肥皂肥皂适硬水原油脂饱性通溴四氯化碳溶液检出时溴加成组成油脂饱脂肪酸双键褪色
α氨基酸茚三酮水合物水溶液中加热时氧化分解生成原α氨基酸少碳原子醛放出分子二氧化碳分子氨时茚三酮原成仲醇生产氨生成具蓝紫色化合物
蛋白质含氮极复杂生物高分子酸碱酶作单纯蛋白质发生水解终产物α氨基酸蛋白质中某氨基酸特殊基团某化学试剂作呈现出种颜色反应种呈色反应作蛋白质氨基酸定性定量根
仪器材料
试10支试1支烧杯（150 mL）1烧杯（400 mL）2酒精灯1白瓷滴板1块带长玻璃软木塞1支
试剂药品
2葡萄糖2果糖2麦芽糖2蔗糖2淀粉3molL硫酸盐酸苯肼醋酸钠溶液10碳酸钠碘液浓硫酸班德试剂红色石蕊试纸西里瓦诺夫试剂棉子油40氢氧化钠溶液乙醇饱食盐水01苯酚溶液蛋白质溶液米伦试剂10盐酸溶液10三氯乙酸溶液1甘氨酸02茚三酮
实验步骤
（） 糖化学性质
1 糖原性：
取试4支加入班德试剂[1]1 mL分加入2葡萄糖2果糖2麦芽糖2蔗糖[2]溶液2滴沸水浴中加热2~3 min溶液行冷观察结果
2 糖脎生成
试2支分加入2葡萄糖2果糖溶液1 mL加入新配制盐酸苯肼醋酸钠[3]溶液1 mL2支试摇匀置沸水浴中加热30 min取出试行冷（什？）时黄色结晶生成[4]取少量结晶显微镜观察糖脎结晶形状
3 颜色反应
（1）莫利许试验：取试4支分加入2葡萄糖2果糖2蔗糖2淀粉溶液1 mL然加入新配制莫利许试剂（α萘酚酒精溶液）2滴混匀支试倾斜壁徐徐加入浓硫酸05~1 mL试静置观察两液界面间出现紫红色环数分钟紫色生成水浴中温热进行观察
（2）西里瓦诺夫试验：取试4支加入西里瓦诺夫试剂（间苯二酚盐酸溶液）1 mL然三试中分加入2葡萄糖2果糖2蔗糖溶液5滴第四支试留作4支试摇匀时放水浴中加热2 min较出现颜色序
4 蔗糖水解
取试2支加入2蔗糖溶液1 mL然1支试中加入3 molL硫酸2滴试放沸水浴中加热5~10 min冷加入10Na2CO3溶液呈碱性（红色石蕊试纸变蓝）两支试加班德试剂10滴放沸水浴中加热3~4 min观察两支试实验结果
5 淀粉性质
（1）碘液作：取1支试加2淀粉溶液10滴加碘液1滴显色？溶液直接酒精灯加热现象？放冷什变化？
（2）水解反应：取试1支加2淀粉溶液2 mL加入浓硫酸3滴水浴中加热煮沸10~15 min加热时隔1~2 min吸吸出1滴反应液滴白瓷滴板加碘液1滴观察结果反应液碘液显色时加热煮沸2~3 min放冷反应液10Na2CO3溶液中（石蕊试纸检验）加入班德试剂5~10滴试放水浴中煮沸2~3 min观察结果
（二） 油脂皂化
取棉子油5滴置试中加入乙醇40氢氧化钠溶液3 mL然试口塞带长玻璃软木塞试放入水浴中加热回流45 min试稍冷已皂化完全[5]溶液倒入盛4 mL饱食盐水烧杯中边边搅拌时肥皂析出肥皂尚未析出溶液冷凝结成肥皂
（三） 氨基酸性质
试中加入1甘氨酸20滴加入02茚三酮5滴摇匀废水中加热3~5 min观察溶液颜色变化
（四） 蛋白质性质
1 茚三酮反应[6]：
1支试中加入蛋白质溶液10滴然加02茚三酮溶液3滴沸水浴中加热5~10 min观察溶液颜色变化
2 米伦反应[7]：
取2支试1支试中加入01苯酚溶液3滴支试中加入蛋白质溶液3滴然两中加入米伦试剂（汞亚汞硝酸盐亚硝酸盐）3滴时蛋白质溶液试中白色沉淀生成两支试放沸水中加热注意两中颜色变化
思考题
1 谓原糖非原糖？
2 区列化合物：果糖葡萄糖蔗糖麦芽糖淀粉
3 什油脂？然界中油脂含什成分？
4 写出三种含硫α氨基酸结构式名称
附注
[1] 班德（Benedict）试剂简称班氏试剂改良斐林试剂成分硫酸铜柠檬酸钠碳酸钠班氏试剂较斐林试剂稳定原糖作极灵敏班德（Benedict）试剂简称班氏试剂改良斐林试剂成分硫酸铜柠檬酸钠碳酸钠班氏试剂较斐林试剂稳定原糖作极灵敏
[2] 蔗糖必须非常纯净否含原糖班德试剂反应
[3] 苯肼难溶水盐酸苯肼醋酸钠混合液起复分解反应生成苯肼醋酸盐结果溶解难度增利苯肼糖生成糖脎反应者醋酸钠尚起缓作调节pH4~6利糖脎生成苯肼溶强酸
[4] 果煮沸程中溶液浓缩溶液呈现淡红色结晶生成须水稀释生成结晶
[5] 试验皂化否完全取1滴反应液置试中加4 mL热蒸馏水油滴析出便皂化已完全停止回流反需继续回流直棉子油完全皂化止
[6] 蛋白质中α氨基酸够茚三酮水合物水溶液中加热时产生蓝色化合物反应α氨基酸反应非常灵敏α氨基酸水溶液稀释11500000呈现颜色
[7] 米伦试剂汞亚汞硝酸盐亚硝酸盐外含量硝酸少量亚硝酸酚类化合物产生颜色反应数蛋白质分子中均含酪氨酸残基酪氨酸酚结构米伦试剂作先生成白色沉淀加热时变红
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实验目
1 熟悉单糖二糖糖性质
2 掌握糖类鉴
3 掌握油脂化学性质
4 掌握氨基酸蛋白质化学性质鉴方法
实验原理
单糖均原性质二糖分子中半缩醛羟基者原性原班德试剂等原糖盐酸苯肼生成糖脎结晶难溶水糖脎生成速度结晶形状熔点均糖异利糖脎生成鉴种糖糖类浓硫酸浓盐酸作酚类化合物缩合成色物质α萘酚作产生紫红色做莫利许试验反应十分复杂利法检出糖类
果糖（酮糖）间苯二酚盐酸溶液作溶液加热快变成鲜红色称西里瓦诺夫试验糖原性酸存加热水解产生分子单糖班德试剂起反应淀粉分子逐步水解溶液碘液作呈颜色蓝变紫红溶液碘液显色时水解终点
油脂般溶水胆盐乳化作油脂微粒较稳定分散水中形成乳浊液油脂般甘油高级脂肪酸呈酯油脂碱性溶液中水解成甘油高级脂肪酸盐——肥皂水解称皂化油脂皂化甘油溶水肥皂水中形成胶体溶液加入饱食盐肥皂盐析出甘油肥皂分开油脂皂化液机酸酸化析出固体高级脂肪酸钙镁等金属盐类作生成溶水钙肥皂镁肥皂肥皂适硬水原油脂饱性通溴四氯化碳溶液检出时溴加成组成油脂饱脂肪酸双键褪色
α氨基酸茚三酮水合物水溶液中加热时氧化分解生成原α氨基酸少碳原子醛放出分子二氧化碳分子氨时茚三酮原成仲醇生产氨生成具蓝紫色化合物
蛋白质含氮极复杂生物高分子酸碱酶作单纯蛋白质发生水解终产物α氨基酸蛋白质中某氨基酸特殊基团某化学试剂作呈现出种颜色反应种呈色反应作蛋白质氨基酸定性定量根
仪器材料
试10支试1支烧杯（150 mL）1烧杯（400 mL）2酒精灯1白瓷滴板1块带长玻璃软木塞1支
试剂药品
2葡萄糖2果糖2麦芽糖2蔗糖2淀粉3molL硫酸盐酸苯肼醋酸钠溶液10碳酸钠碘液浓硫酸班德试剂红色石蕊试纸西里瓦诺夫试剂棉子油40氢氧化钠溶液乙醇饱食盐水01苯酚溶液蛋白质溶液米伦试剂10盐酸溶液10三氯乙酸溶液1甘氨酸02茚三酮
实验步骤
（） 糖化学性质
1 糖原性：
取试4支加入班德试剂[1]1 mL分加入2葡萄糖2果糖2麦芽糖2蔗糖[2]溶液2滴沸水浴中加热2~3 min溶液行冷观察结果
2 糖脎生成
试2支分加入2葡萄糖2果糖溶液1 mL加入新配制盐酸苯肼醋酸钠[3]溶液1 mL2支试摇匀置沸水浴中加热30 min取出试行冷（什？）时黄色结晶生成[4]取少量结晶显微镜观察糖脎结晶形状
3 颜色反应
（1）莫利许试验：取试4支分加入2葡萄糖2果糖2蔗糖2淀粉溶液1 mL然加入新配制莫利许试剂（α萘酚酒精溶液）2滴混匀支试倾斜壁徐徐加入浓硫酸05~1 mL试静置观察两液界面间出现紫红色环数分钟紫色生成水浴中温热进行观察
（2）西里瓦诺夫试验：取试4支加入西里瓦诺夫试剂（间苯二酚盐酸溶液）1 mL然三试中分加入2葡萄糖2果糖2蔗糖溶液5滴第四支试留作4支试摇匀时放水浴中加热2 min较出现颜色序
4 蔗糖水解
取试2支加入2蔗糖溶液1 mL然1支试中加入3 molL硫酸2滴试放沸水浴中加热5~10 min冷加入10Na2CO3溶液呈碱性（红色石蕊试纸变蓝）两支试加班德试剂10滴放沸水浴中加热3~4 min观察两支试实验结果
5 淀粉性质
（1）碘液作：取1支试加2淀粉溶液10滴加碘液1滴显色？溶液直接酒精灯加热现象？放冷什变化？
（2）水解反应：取试1支加2淀粉溶液2 mL加入浓硫酸3滴水浴中加热煮沸10~15 min加热时隔1~2 min吸吸出1滴反应液滴白瓷滴板加碘液1滴观察结果反应液碘液显色时加热煮沸2~3 min放冷反应液10Na2CO3溶液中（石蕊试纸检验）加入班德试剂5~10滴试放水浴中煮沸2~3 min观察结果
（二） 油脂皂化
取棉子油5滴置试中加入乙醇40氢氧化钠溶液3 mL然试口塞带长玻璃软木塞试放入水浴中加热回流45 min试稍冷已皂化完全[5]溶液倒入盛4 mL饱食盐水烧杯中边边搅拌时肥皂析出肥皂尚未析出溶液冷凝结成肥皂
（三） 氨基酸性质
试中加入1甘氨酸20滴加入02茚三酮5滴摇匀废水中加热3~5 min观察溶液颜色变化
（四） 蛋白质性质
1 茚三酮反应[6]：
1支试中加入蛋白质溶液10滴然加02茚三酮溶液3滴沸水浴中加热5~10 min观察溶液颜色变化
2 米伦反应[7]：
取2支试1支试中加入01苯酚溶液3滴支试中加入蛋白质溶液3滴然两中加入米伦试剂（汞亚汞硝酸盐亚硝酸盐）3滴时蛋白质溶液试中白色沉淀生成两支试放沸水中加热注意两中颜色变化
思考题
1 谓原糖非原糖？
2 区列化合物：果糖葡萄糖蔗糖麦芽糖淀粉
3 什油脂？然界中油脂含什成分？
4 写出三种含硫α氨基酸结构式名称
附注
[1] 班德（Benedict）试剂简称班氏试剂改良斐林试剂成分硫酸铜柠檬酸钠碳酸钠班氏试剂较斐林试剂稳定原糖作极灵敏班德（Benedict）试剂简称班氏试剂改良斐林试剂成分硫酸铜柠檬酸钠碳酸钠班氏试剂较斐林试剂稳定原糖作极灵敏
[2] 蔗糖必须非常纯净否含原糖班德试剂反应
[3] 苯肼难溶水盐酸苯肼醋酸钠混合液起复分解反应生成苯肼醋酸盐结果溶解难度增利苯肼糖生成糖脎反应者醋酸钠尚起缓作调节pH4~6利糖脎生成苯肼溶强酸
[4] 果煮沸程中溶液浓缩溶液呈现淡红色结晶生成须水稀释生成结晶
[5] 试验皂化否完全取1滴反应液置试中加4 mL热蒸馏水油滴析出便皂化已完全停止回流反需继续回流直棉子油完全皂化止
[6] 蛋白质中α氨基酸够茚三酮水合物水溶液中加热时产生蓝色化合物反应α氨基酸反应非常灵敏α氨基酸水溶液稀释11500000呈现颜色
[7] 米伦试剂汞亚汞硝酸盐亚硝酸盐外含量硝酸少量亚硝酸酚类化合物产生颜色反应数蛋白质分子中均含酪氨酸残基酪氨酸酚结构米伦试剂作先生成白色沉淀加热时变红
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