:酶切
1)载体:pNZ814820度冰箱第二格子橙色放15ml离心板(特征:盖写pnz1pnz2pnz3pnz18已没面吸附柱面15ml离心)载体浓度较高27号做酶切回收回收产物(加溶胶液未纯化)20度冰箱需DNA回收试剂盒提取
2)目基:均连T5载体R基位置特征pNZ8148面写(R1R2R3…)R已提质粒酶切没切开测nano决定重新摇酶切
3)保藏菌种均20度冰箱第二格(袋中袋写igem带功基菌种保存中袋中袋袋里菌)
4)B基15ml离心里20度冰箱第二格白色盒子量挺十合起标号忘面分出
5)酶处缺(赵老师HindIII(NEBTARARA)尹老师XbaI(NEB))TAKARA缓液1*MNEBNEBuffer 2NEBBuffer 2体系量10(100u体系加10ul)
6)酶切3h
二:连接
连接酶(没做加连接酶)问问李贽张贺(张贺回话)加完基载体酶缓液(知道加加)加solution 23忘
三:转化
1)TransT1问赵信组
2)氯霉素板4°冰箱数第格写着CmpNZ8148氯霉素抗性
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