课题2 土壤中分解尿素细菌分离计数教学设计
教学目标
1掌握筛选微生物实验原理分离微生物熟练配制选择培养基
2分析研究思路形成程节课细菌筛选提供思路启迪
3掌握微生物培养程菌操作
二教学重点
1土样选取选择培养基配制
2实验流程设计
三教学难点
分解尿素细菌计数
四教学方法
启发式教学
五教学工具
媒体课件
六教学程
（）新课引入
1尿素种重氮肥农作物直接吸收利首先通土壤中细菌尿素分解 氨CO2 细菌合成脲酶
2体外DNA量复制扩增技术称DNA聚酶链式反应该技术动化需种酶———耐高温DNA聚合酶应该寻找种酶呢？高温环境中找聪明科学家热泉中找种耐热细菌Taq中筛选出耐高温TaqDNA聚合酶 ：热泉高温条件淘汰绝数微生物 程否种思路种分解尿素细菌应该分离出？
（二）容讲解
1实验基础知识点讲解
11实验室中微生物筛选原理：提供利目菌株生长条件（包括营养温度PH等）时抑制阻止微生物生长
生物适应定环境环境生物具选择作通配制选择培养基控制培养条件等选择目微生物
12教材22页左角培养基配方回答列问题：
〖思考1〗该培养基配方中微生物生长提供碳源 葡萄糖 提供氮源 尿素 琼脂作 凝固剂
〖思考2〗该培养基微生物 具 选择作选择机制 够尿素作氮源微生物该培养基生长
13统计菌落数目时常统计样品中活菌数目方法 稀释涂布板法 外 显微镜直接计数法 测定微生物数量常方法
14采稀释涂布板法统计菌落数目时培养基表面生长菌落源样品稀释液中活菌 通统计板菌落数 推测出样品中约含少活菌保证结果准确般选择菌落数 30～300 板进行计数
〖思考3〗板菌落数推测出克样品中菌落数计算方法 （均菌落数÷涂布稀释液体积）×稀释倍数
〖思考4〗利稀释涂布板法成功统计菌落数目关键 正确选择稀释度
〖思考5〗教材22页案例位学结果更接真实值？认两位学实验需改进？果需改进？
第 二 位学结果接真实值两位学实验需改进：第位学需设置重复实验组第二位学统计三菌落数相差太说明操作误需重新实验
15统计菌落数活菌实际数目 低 两细胞起时板观察菌落统计结果般 菌落数 表示
16设置目排实验组中非测试素实验结果影响提高实验结果信度
17实验指 测试条件外条件 相 实验满足该条件称 组未满足该条件称 实验组
〖思考6〗教材22页案例二通设置帮助A学排述两影响实验结果素？：
方案1：学A学土样进行实验
方案2：A学接种培养基作空白
2．实验设计
2．1 实验设计容包括实验方案材料具实施步骤时间安排等
2．2 土壤微生物分布距表3～8cm中性土壤中约70％～90％细菌
2．3 分离微生物采稀释度原微生物土壤中含量目保证获菌落数30～300间适计数板细菌稀释度104105106放线菌稀释度103104105真菌稀释度102103104
2．4 培养微生物需培养温度细菌般30～37℃培养1～2d放线菌般25～28℃培养5～7d霉菌般25～28℃温度培养3～4d
2．5 菌落计数时隔24h统计次菌落数目选取菌落数目稳定时记录作结果防止培养时间足导致遗漏菌落数目
点评：菌种中菌体增殖快菌体增值慢培养时间充足菌体形成肉眼观察菌落
2．6菌落特征包括 形状隆起程度颜色 等方面
〖思考8〗土壤微生物种类数量原什？土壤中营养物质含量丰富环境条件适宜等
2．7 实验程
1）取土样铁铲盛土样信封前灭菌
2）应火焰旁称取土壤 10 g称土样倒入盛90mL菌水锥形瓶中塞棉塞
3）稀释土壤溶液程中步火焰旁进行
4）实验时培养皿作标记注明培养基类型培养时间稀释度培养物等
5）提高效率操作时更加条紊应事先规划时间
〖思考9〗研究未知微生物时务必规范操作防致病微生物感染实验定洗手
3．结果分析评价
细菌分解尿素化学反应中细菌合成 脲酶 尿素分解成 氨 氨会培养基碱性 增强 PH 升高 尿素 唯氮源培养基中加入 酚红 指示剂培养某种细菌果PH升高指示剂变 红 说明该细菌够 分解尿素
七板书设计
1土壤中分解尿素细菌分离计数
2实验室中微生物筛选原理
3菌落数目统计方法：稀释涂布板法显微镜直接计数法
4设置实验应注意问题原
5实验设计流程
6尿素分解菌进步鉴定：尿素唯氮源培养基中加入酚红指示剂进行培养指示剂变红该细菌分解尿素
八作业布置：
步解析测评学考练相应章节题
九教学反思：
节课尿素农业重应引入介绍分解尿素细菌类型进说明种细菌作够合成分解尿素酶教学程中联系生产生活实际学生尿素分解尿素细菌形成定认识实验中原生物实验时应遵循基原规范通实验练进行熟练掌握
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教学目标
1掌握筛选微生物实验原理分离微生物熟练配制选择培养基
2分析研究思路形成程节课细菌筛选提供思路启迪
3掌握微生物培养程菌操作
二教学重点
1土样选取选择培养基配制
2实验流程设计
三教学难点
分解尿素细菌计数
四教学方法
启发式教学
五教学工具
媒体课件
六教学程
（）新课引入
1尿素种重氮肥农作物直接吸收利首先通土壤中细菌尿素分解 氨CO2 细菌合成脲酶
2体外DNA量复制扩增技术称DNA聚酶链式反应该技术动化需种酶———耐高温DNA聚合酶应该寻找种酶呢？高温环境中找聪明科学家热泉中找种耐热细菌Taq中筛选出耐高温TaqDNA聚合酶 ：热泉高温条件淘汰绝数微生物 程否种思路种分解尿素细菌应该分离出？
（二）容讲解
1实验基础知识点讲解
11实验室中微生物筛选原理：提供利目菌株生长条件（包括营养温度PH等）时抑制阻止微生物生长
生物适应定环境环境生物具选择作通配制选择培养基控制培养条件等选择目微生物
12教材22页左角培养基配方回答列问题：
〖思考1〗该培养基配方中微生物生长提供碳源 葡萄糖 提供氮源 尿素 琼脂作 凝固剂
〖思考2〗该培养基微生物 具 选择作选择机制 够尿素作氮源微生物该培养基生长
13统计菌落数目时常统计样品中活菌数目方法 稀释涂布板法 外 显微镜直接计数法 测定微生物数量常方法
14采稀释涂布板法统计菌落数目时培养基表面生长菌落源样品稀释液中活菌 通统计板菌落数 推测出样品中约含少活菌保证结果准确般选择菌落数 30～300 板进行计数
〖思考3〗板菌落数推测出克样品中菌落数计算方法 （均菌落数÷涂布稀释液体积）×稀释倍数
〖思考4〗利稀释涂布板法成功统计菌落数目关键 正确选择稀释度
〖思考5〗教材22页案例位学结果更接真实值？认两位学实验需改进？果需改进？
第 二 位学结果接真实值两位学实验需改进：第位学需设置重复实验组第二位学统计三菌落数相差太说明操作误需重新实验
15统计菌落数活菌实际数目 低 两细胞起时板观察菌落统计结果般 菌落数 表示
16设置目排实验组中非测试素实验结果影响提高实验结果信度
17实验指 测试条件外条件 相 实验满足该条件称 组未满足该条件称 实验组
〖思考6〗教材22页案例二通设置帮助A学排述两影响实验结果素？：
方案1：学A学土样进行实验
方案2：A学接种培养基作空白
2．实验设计
2．1 实验设计容包括实验方案材料具实施步骤时间安排等
2．2 土壤微生物分布距表3～8cm中性土壤中约70％～90％细菌
2．3 分离微生物采稀释度原微生物土壤中含量目保证获菌落数30～300间适计数板细菌稀释度104105106放线菌稀释度103104105真菌稀释度102103104
2．4 培养微生物需培养温度细菌般30～37℃培养1～2d放线菌般25～28℃培养5～7d霉菌般25～28℃温度培养3～4d
2．5 菌落计数时隔24h统计次菌落数目选取菌落数目稳定时记录作结果防止培养时间足导致遗漏菌落数目
点评：菌种中菌体增殖快菌体增值慢培养时间充足菌体形成肉眼观察菌落
2．6菌落特征包括 形状隆起程度颜色 等方面
〖思考8〗土壤微生物种类数量原什？土壤中营养物质含量丰富环境条件适宜等
2．7 实验程
1）取土样铁铲盛土样信封前灭菌
2）应火焰旁称取土壤 10 g称土样倒入盛90mL菌水锥形瓶中塞棉塞
3）稀释土壤溶液程中步火焰旁进行
4）实验时培养皿作标记注明培养基类型培养时间稀释度培养物等
5）提高效率操作时更加条紊应事先规划时间
〖思考9〗研究未知微生物时务必规范操作防致病微生物感染实验定洗手
3．结果分析评价
细菌分解尿素化学反应中细菌合成 脲酶 尿素分解成 氨 氨会培养基碱性 增强 PH 升高 尿素 唯氮源培养基中加入 酚红 指示剂培养某种细菌果PH升高指示剂变 红 说明该细菌够 分解尿素
七板书设计
1土壤中分解尿素细菌分离计数
2实验室中微生物筛选原理
3菌落数目统计方法：稀释涂布板法显微镜直接计数法
4设置实验应注意问题原
5实验设计流程
6尿素分解菌进步鉴定：尿素唯氮源培养基中加入酚红指示剂进行培养指示剂变红该细菌分解尿素
八作业布置：
步解析测评学考练相应章节题
九教学反思：
节课尿素农业重应引入介绍分解尿素细菌类型进说明种细菌作够合成分解尿素酶教学程中联系生产生活实际学生尿素分解尿素细菌形成定认识实验中原生物实验时应遵循基原规范通实验练进行熟练掌握
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